https://scholars.lib.ntu.edu.tw/handle/123456789/143301
標題: | 台灣本土溫嗜熱菌的調查收集鑑定及其農業上之應用─台灣溫泉中好氧性嗜熱細菌之分離及其特性之探討(2/2) | 作者: | 張文章 | 公開日期: | 31-七月-2003 | 出版社: | 臺北市:國立臺灣大學生化科學研究所 | 摘要: | 1. 台灣溫泉中嗜熱菌的分離與種源庫的建立:本研究已對台灣地區22 處地熱溫泉區進行樣本 的採集與分析,同時進行好氧性嗜熱菌的分離、純化、培養與鑑定,並以低溫冷凍櫃及冷 凍乾燥法進行種源之長期保存。截至目前為止,得到分離之本土嗜熱菌株種源庫共計有株 416 株(好氧性 320 株,厭氧性 96 株),分別存於國立台灣大學、中央研究院生物化學研 究所慈濟大學等三地。種源庫內菌株經格蘭氏染色,電子顯微鏡觀察、16 S rDNA 分析及 酵素分析,已有部分分離株具鑑定結果,分屬格蘭氏陽性的Bacillus 、Geobacillus 、 Rubrobacter 、Deinococcus 、Caloramator 及Thermobrachium 等菌屬;及格蘭氏陰性的細 菌,包含Thermus 、Meiothermus 、Chloroflexus、Rhodothermus、及Pseudoxanthomonas 等 屬;以16 S rDNA 序列分析研判,其中有部份的高溫菌為本土的新屬或新種。 2. 具高酵素活性嗜熱菌株之篩選與相關基因選殖: 對本土嗜熱菌進行酵素活性的分析,發現有20% 菌株具澱粉水解脢活性,25%菌株具蛋白 脢活性及38%菌株具脂質水解脢活性,目前已針對這些具活性菌株進行深入的分析,期能 篩選出高活性之菌株。 3. 高抗性嗜熱菌分離株的篩選 發現許多具高紫外線及輻射線的菌株,如具多樣酵素活性與高紫外線抗性及高γ-radiation 抗性的新種菌株 Rubrobacter taiwanensis LS-293T 及 Deinococcus taiwanensis WR-407T,極 具作為表現載體的潛力。此外利用高劑量紫外線及γ-radiation 對溫泉樣品作前處理,分離高 抗性菌株,共計得到 87 株分離株(50 oC 計60 株;60 oC 計 17 株;70 oC 計10 株),部份 經16S rDNA 序列鑑定後分屬Deinococcus sp.、Rubrobacter sp.、Bacillus sp.、Geobacillus sp.、 Thermus sp. 等菌屬,其輻射線抗性、生理遺傳特性與酵素活性將為下一步之研究方向。 4. 熱穩定性酵素基因的選殖載體構築與表現系統的建立: 目前已利用快速篩選質體的方式,篩選出53 株具質體的高溫菌株,並利用當中NTU-103 菌株質體建構出一個shuttle vector-p103,未來將以其為基礎,嘗試表現由本土嗜熱菌所選 殖出熱穩定酵素的基因,以達到大量表現酵素的目的。 |
URI: | http://ntur.lib.ntu.edu.tw//handle/246246/10247 | 其他識別: | 912317B002014 | Rights: | 國立臺灣大學生化科學研究所 |
顯示於: | 生化科學研究所 |
檔案 | 描述 | 大小 | 格式 | |
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