A high throughput system for transposon tagging and promoter trapping in tomato
Resource
The Plant Journal (2000)22(3), 265-274
Journal
The Plant Journal (2000)22(3)
Pages
265-274
Date Issued
2000-09-27
Date
2000-09-27
Author(s)
莊函寧
DOI
20060927123023929967
Abstract
作者以玉米的Ac/Ds 轉位子插入小型蕃茄品種Micro-Tom㆗,使蕃茄
突變。本文即以此為背景,介紹了㆒個可分析蕃茄基因組的新方法。在2932
個F3 families 蕃茄㆗,有跳躍的Ds,且性質穩定者用以作為外表型突變的
選拔。在此之㆗,有10個families 有明顯的外表型變異,但只有㆒個有偵
測到Ds的存在。此外,作者發展了用螢火蟲冷光報導基因來調取啟動子
(promoter trapping),及利用GUS來調取強化子(enhancer trapping)。本
篇也證實了冷光酵素(luciferase)基因為不具破壞性的報導基因,可用來鑑
定、分離及體細胞的再生。運用㆖述方法可對突變的表現作定期的追蹤以
及定量可誘導的基因。在108個做冷光活性選拔的families㆗,花㆗有55
﹪的冷光活性,果實㆗有11﹪,種子㆗只有4﹪。由此推測,可能有很高
比例的Ds插入基因㆗。藉由分析Ds附近的序列,發現在50個有Ds插入
的基因㆗有28個與已知道功能的基因,或不太清楚功能的ESTs相似。總
之,在此所談到的2932個lines ㆗,每個line包含了2~3個Ds的插入,這
表示本次實驗共約有7500個Ds的插入蕃茄的基因㆗。藉此可大量分析蕃
茄㆗的基因功能及啟動子(promoter)的區域分離。這個方法在未來將會有
很大的利用空間。
Publisher
臺北市:國立臺灣大學農藝學系
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