台灣本土溫嗜熱菌的調查收集鑑定及其農業上之應用─台灣溫泉中好氧性嗜熱細菌之分離及其特性之探討(2/2)
Date Issued
2003-07-31
Date
2003-07-31
Author(s)
張文章
DOI
912317B002014
Abstract
1. 台灣溫泉中嗜熱菌的分離與種源庫的建立：本研究已對台灣地區22 處地熱溫泉區進行樣本
的採集與分析，同時進行好氧性嗜熱菌的分離、純化、培養與鑑定，並以低溫冷凍櫃及冷
凍乾燥法進行種源之長期保存。截至目前為止，得到分離之本土嗜熱菌株種源庫共計有株
416 株（好氧性 320 株，厭氧性 96 株），分別存於國立台灣大學、中央研究院生物化學研
究所慈濟大學等三地。種源庫內菌株經格蘭氏染色，電子顯微鏡觀察、16 S rDNA 分析及
酵素分析，已有部分分離株具鑑定結果，分屬格蘭氏陽性的Bacillus 、Geobacillus 、
Rubrobacter 、Deinococcus 、Caloramator 及Thermobrachium 等菌屬；及格蘭氏陰性的細
菌，包含Thermus 、Meiothermus 、Chloroflexus、Rhodothermus、及Pseudoxanthomonas 等
屬；以16 S rDNA 序列分析研判，其中有部份的高溫菌為本土的新屬或新種。
2. 具高酵素活性嗜熱菌株之篩選與相關基因選殖：
對本土嗜熱菌進行酵素活性的分析，發現有20% 菌株具澱粉水解脢活性，25%菌株具蛋白
脢活性及38%菌株具脂質水解脢活性，目前已針對這些具活性菌株進行深入的分析，期能
篩選出高活性之菌株。
3. 高抗性嗜熱菌分離株的篩選
發現許多具高紫外線及輻射線的菌株，如具多樣酵素活性與高紫外線抗性及高γ-radiation
抗性的新種菌株 Rubrobacter taiwanensis LS-293T 及 Deinococcus taiwanensis WR-407T，極
具作為表現載體的潛力。此外利用高劑量紫外線及γ-radiation 對溫泉樣品作前處理，分離高
抗性菌株，共計得到 87 株分離株（50 oC 計60 株；60 oC 計 17 株；70 oC 計10 株），部份
經16S rDNA 序列鑑定後分屬Deinococcus sp.、Rubrobacter sp.、Bacillus sp.、Geobacillus sp.、
Thermus sp. 等菌屬，其輻射線抗性、生理遺傳特性與酵素活性將為下一步之研究方向。
4. 熱穩定性酵素基因的選殖載體構築與表現系統的建立：
目前已利用快速篩選質體的方式，篩選出53 株具質體的高溫菌株，並利用當中NTU-103
菌株質體建構出一個shuttle vector-p103，未來將以其為基礎，嘗試表現由本土嗜熱菌所選
殖出熱穩定酵素的基因，以達到大量表現酵素的目的。
Publisher
臺北市：國立臺灣大學生化科學研究所
Type
report
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