花生簇葉病病原菌質體gyrB和gyrA基因之選殖與分析(2/2)
Date Issued
2004
Date
2004
Author(s)
林長平
DOI
922313B002059
Abstract
本研究在進行花生簇葉病（Peanut witches’ broom, PNWB）病原菌質體
（phytoplasma）gyrB 基因選殖時，以Acholeplasma laidlawii及Mycoplasma spp. 等
細菌之gyrB 基因進行比對，根據其高保守性區域設計PCR 引子，再以花生簇葉
病病原菌質體DNA 為模板進行PCR 反應，獲得一1.4 kb 大小之PCR 產物，再
以此序列設計PCR 引子對以增幅出篩選用核酸探針，並藉以篩選花生簇葉病病
原菌質體之基因庫，遂獲得一選殖株重組質體pPGB 1-4 其DNA 嵌入片段包含
三個完整open reading frame（ORF）。而藉由pPGB 1-4 上已知序列及比對其他細
菌gyrA 基因核酸序列，設計PCR 引子對增幅出gyrA 篩選用探針，並成功的選
殖出另一重組質體pPGA 2-3，經核酸序列解序後與pPGB 1-4 序列共同進行核酸
序列分析，獲得另一完整的ORF 序列。其中ORF3 及ORF4 應分別為花生簇葉
病病原菌質體之gyrB 及gyrA 基因。由南方氏雜合反應的結果可發現在花生簇葉
病病原菌質體中應僅具有單一套（single copy number）之gyrB 基因及gyrA 基因。
而由RT-PCR 反應的結果可發現，在花生簇葉病病原菌質體中gyrB 及gyrA 基因
有可能是以gyrB-gyrA cotranscription 的方式進行轉錄。
Subjects
gyrB 基因
gyrA 基因
花生簇葉病
Publisher
臺北市：國立臺灣大學植物病理與微生物學系暨研究所
Type
other
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