人類骨髓中胚層幹細胞培養成專業生骨能力的研究
Date Issued
2003
Date
2003
Author(s)
林繼昌
DOI
912314B002264
Abstract
臨床上中遇到重大外傷、感染清
創或是腫瘤切除後，都會有骨大量缺
損的問題發生，過去以骨移植為唯一
的利器，而新的策略有很多選擇，乃
根據外傷修復和硬骨癒合的必要條件
予以增強，其中最重要的組件即為生
骨能力細胞。已有研究嘗試於老鼠治
療大腿骨幹之分段型缺損，用同源中
胚層幹細胞使骨頭再生，其中顯示細
胞裝載在多孔性陶瓷材料上後植入動
物體缺損區內，可不經軟骨中介階
段，產生新生硬骨頭。也有實驗室顯
示範可以從人體的骨髓取得中胚層幹
細胞，加上有關臨床研究提供了此以
人體中胚層幹細胞為根基治療修復長
骨幹分段型缺損模型的契機。
本研究計劃目的為建立人類骨髓
中胚層幹細胞分離和組織培養的流
程，並試驗其生骨的實際能力。直接
採用骨外型之實驗，在未具免疫之裸
鼠背部皮下植入，同時比較將此幹細
胞載入二鈣磷酸鹽陶瓷材料片與否，
有否影響其真正生骨之能力，冀求其
能在臨床應用有所助益。
實驗內容選擇十位骨科病人抽取
骨髓10 ml，以Percoll 溶液依密度離心
取出低密度細胞層，以1x107 細胞密度
平鋪於60cm2 培養皿培養，培養液主
要內含10% 胎牛血清、適量抗生素之
DMEM，培養兩至三星期。再將細胞
轉入二代次培養Subculture，培養液加
調有100nM dexamethasone、10nMβ
-glyerophosphate、0.05mM ascorbic acid
及低葡萄糖濃度之DMEM，培養十四
天。培養過程中，依次做細胞計數、
細胞活性、細胞繁殖能力檢測及鹼性
磷酸鹽酵素檢測，以做比較。將新鮮
骨髓細胞、初級及二代次培養幹細
胞，分別裝載到GTG 載體材料片上，
植入於裸鼠背部皮下，從植入後二至
四週取下標本，從組織切片驗證其生
骨之能力。
研究結果證明可以成功的從人類
骨髓中獲得大量的中胚層幹細胞，並
可在活體外表現分化生骨能力，同時
以GTG 材料作為移植載體，將人類骨
髓中胚層幹細胞移植在裸鼠肌肉下，
細胞可以成功地分化增生有生骨能力
的細胞，而植入皮下者表現遠不如肌
肉植入。顯示在肌肉的環境下，含有
能夠持續刺激幹細胞分化增生的因
子；也可能是在肌肉中分布的微血管
比皮下更多，能提供豐富的養分使細
胞生長分化所造成的差異。
Subjects
中胚層幹細胞
人類骨髓
磷酸鹽陶瓷
組織培養
Publisher
臺北市：國立臺灣大學醫學院骨科
Type
journal article
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