SARS冠狀病毒分離株之繼代培養、生長特性及中和分析與P3實驗室之運作
Date Issued
2005
Date
2005
Author(s)
高全良
DOI
932751B002002Y
Abstract
SARS(急性嚴重呼吸道症候群) 為2003 年爆發之新興感染症，包括大陸、香港、越
南、加拿大為主要流行區，台灣也受到明顯的衝擊。國外研究顯示新型冠狀病毒為引起
SARS之重要病原。新加波之研究報告更進一步針對病毒分離株進行全長病毒基因之解碼
發現至少有兩種之基因型之SARS冠狀病毒存在。不同基因型可能與不同地區流行SARS
有關。台灣地區自2003 年3 月中旬發生首例之SARS病例以來，一共造成三波之流行。
此些不同之流行其病毒是否相同是值得探討之主題。本計畫，針對2003 年之SARS病例，
進行病毒之分離與鑑定。共有10 株病毒被分離成功。由其中選擇TW1 及TW6 兩株病毒
做為研究對象。首先將TW1 分別感染不同之細胞株(Vero E6, FRHK-4, MK-2, HEp-2,
A549, MDCK, BEAS-2B, Hep-G2, QT, Molt-4, U937, Jurkat)，結果發現來自猴子之細胞株
(Vero E6, FRHK-4, MK-2)，可以讓SARS-CoV(TW1)生長。其中又以Vero E6，可得最佳
之結果。將TW1 連續在Vero E6 細胞中繼代培養10 代後，仍然生長良好。病毒產量仍維
持在1X109，顯示此病株可能可做為疫苗選擇之參考。本計畫亦同時建立一SARS病毒中
和抗體的參考實驗室，以檢測免疫動物之血清及單株抗體中是否存在SARS病毒之中和抗
體。本實驗使用SARS冠狀病毒TW-1 株及猴腎細胞 Vero E6，使用傳統的96 孔微量滴定
盤TCID50 抑制法，建立病毒中和試驗分析系統。利用此系統，檢測了13 個SARS病患之
血清，結果發現此13 件檢體，同時對台灣地區前後流行期分離之病毒株(TW1 及TW6)，
所產生之中和抗體無明顯之差異，顯示如選擇其中任1 株病毒，當疫苗所產生之抗體，
應可保護此段期間SARS-CoV之感染。同時為因應疫苗的發展具有時效性評估之需求，
本研究亦同時發展一個快速的中和實驗。結合反轉錄反應與即時聚合脢連鎖反應，用來
偵測在中和反應之判定，初步結果顯示約8 小時後，即可藉由測定在細胞中病毒所表達
出的正向及反向RNA量以判定是否有中和。此種方法不僅快速，且能減少在顯微鏡下的
觀察時間及減少在第三級實驗室中工作的時間。此快速法也作了初步測試，顯示此為可
行之方法。
本計畫亦提供P3 實驗室之維持。使得台大醫學校區之SARS 相關研究得以進行。而利用
P3 實驗室，加上所建立之中和實驗。也替來自台大醫學校區、中研院、國衛院及生技產
業等各PI 提供多次之檢測服務。
Subjects
嚴重呼吸道症候群
冠狀病毒
病毒分離與鑑定
中和試驗
Publisher
臺北市：國立臺灣大學醫學院醫學檢驗暨生物技術學系
Type
journal article
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