探討hHO-1 及HLA-DR 基因轉殖豬皮膚移植於hPBMC-SCID 小鼠之急性細胞性排斥反應

不過器官來源短缺，促使科學家尋求異種器官來源。豬在解剖構造及生理功能
與人類極為近似，數量多，又無猿猴保育之問題，可為人類異種器官最佳的來源。科
學家以人類壞死加速因子(hDAF)基因進行基因轉殖豬之產製，並由該基因轉殖豬器
官移植給狒狒之前臨床實驗，證實移植之器官可克服超急性排斥反應。本計畫利用台
灣養豬科學研究所(PRIT)產製的hDAF基因轉殖豬，試驗本土hDAF基因轉殖豬減緩
異種器官移植中超急性排斥之程度。
實驗設計，是以HLA-DR基因轉殖豬皮膚移植於HLA-DR、HO-1、HLADR/
HO-1基因轉殖鼠背部（實驗組），或以HLA-DR基因轉殖豬皮膚移植於非基因轉
殖鼠背部（對照組），於豬皮移植後第一天、第二天、第三天、第七天、第十天各犧
牲二對配對之小鼠，作切片檢查及血液檢查，包括檢驗皮膚排斥時間，病理變化
（H&E染色）、細胞激素(使用ELISA方法測量TNF-、IL-6)、免疫細胞(使用Flow
Cytometry方法測量CD4+CD25+、及CD8+ T 細胞)
實驗結果，以HLA-DR基因轉殖豬皮膚移植於HLA-DR、HO-1、HLADR/
HO-1基因轉殖鼠背部（實驗組），或以HLA-DR基因轉殖豬皮膚移植於非基因轉
殖鼠背部（對照組），可以以肉眼觀察，加上豬皮組織切片在hematoxylin and eosin
染色下觀察，可以判定，所有豬皮都在移植後14天內被小鼠排斥，可見明顯淋巴球細
胞侵潤。實驗組與對照組沒有明顯差異。
由Flow Cytometry數值看出，無論實驗組或對照組，CD8+ T 細胞在豬皮移植
後前二天，數值都很低，平均為1.4% –2.6%；而在豬皮移植後二天至七天，數值大
幅上升，平均為12.4% - 19.5 %，高峰在豬皮移植後七天至十天，可達49.6% -
53.6%，之後逐漸降到正常值4.54%。CD4+CD25+ T 細胞在豬皮移植後十天內，數
值變化不大，平均為6.3% - 6.7%。
由CD8+ ， 及CD4+CD25+ T 細胞變化推論，所有豬皮都在移植後14天內被排
斥，主要是自移植後第三天起，被增加的小鼠CD8+ T 細胞排斥掉；豬皮被排斥掉的
時間，約在移植後第七天至第十天。由於CD4+CD25+ T 細胞在移植後第十天仍未增
加，故無法發揮調節或抑制CD8+ T 細胞的作用。
TNF-、IL-2、IL-6細胞激素的變化，移植後之數值參差不齊，沒有一致的趨
勢，無法區分實驗組與對照組差異，故不是好指標。以HLA-DR基因轉殖豬皮膚移植
至於喪失T/B/NK細胞功能之SCID小鼠背部之資料正整理中。
目前已經建立模擬人類單核白血球排斥豬皮的動物試驗，以檢驗HLA-DR基因
轉殖豬皮膚是否可以預防異體移植之急性細胞性排斥，實驗結果將整理成論文，投稿
相關期刊。往後實驗，應該增加免疫抑制劑的使用，抑制CD8+ T 細胞排斥作用，直
到CD4+CD25+ T 細胞增加，法發揮調節或抑制CD8+ T 細胞的作用。