靈芝多醣之分析與鑑定(2/3)
Date Issued
2001
Date
2001
Author(s)
孫璐西
DOI
892313B002207
Abstract
螢光染劑aniline blue 是植物顯微鏡染
色時常用的染劑,對β-(1→3)-D-glucan
(葡聚醣)具有專一結合性質,本實驗利
用此專一特性來檢測靈芝樣品中的β-(1
→3)-D-葡聚糖含量。除自行純化自靈芝
(Ganoderma lucidum)之多醣(GLPS)外,也
使用數種商業獲得的β-(1→3)-D-葡聚
糖:laminarin、lentinan 及Krestin 進行分
析,結果發現濃度與螢光強度間具有良好
的線性關係,線性範圍在0 至50μg/ml
間。進一步檢測常用培養基組成分對本方
法的影響,發現單純的培養基組成分,如
葡萄糖、麥芽糖、糊精、澱粉對呈色沒有
顯著影響,但複雜的組成如酵母、麥芽萃
取物、peptone 或potato dextrose broth,對
於呈色有著不同程度的降低,然而可經由
不含葡聚醣的培養基做調整背景值校正。
所使用的靈芝多醣為由子實體以熱水萃
出,經蛋白水解酵素去除蛋白質,澱粉葡
萄糖酵素去除澱粉,以及用四級銨鹽沈降
法去除帶負電的多醣後,經檢測不含
hexosamines、 uronic acids 與蛋白質;單
醣組成分析發現其主要構成成分為葡萄糖
(75%)與半乳糖(17%),另有少量的
阿拉伯糖(5%)和甘露糖(3%);以
13C-NMR 檢測,確認其主體多醣的結構為
β-(1→3)-D-glucan;以分子篩層析儀(size
exclusion chromatography)結合多角度雷
射光散射儀(multi angle laser light scatter)
檢測分子量的分佈,發現其主要部分的分
子量約為1.85×105。另外,也從靈芝液態
發酵液以上述純化步驟,萃取多醣,發現
發酵所得多醣與由子實體所得多醣之化學
結構與螢光反應性質相似,但有較高蛋白
質含量。目前正進行其分子量分佈的測
量。
Subjects
靈芝
β-1,3-D-葡聚糖
aniline
blue
blue
螢光光譜定量分析
多醣
Publisher
臺北市:國立臺灣大學食品科技研究所
Type
report
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