The impacts of gold nanoparticles on DNA separation by capillary electrophoresis and photosynthesis of gold nanoparticles in the presence of proteins

Date Issued

2004

Date

2004

Author(s)

Chiou, Shin-Huei

DOI

zh-TW

URI

http://ntur.lib.ntu.edu.tw//handle/246246/51995

Abstract

本論文主要分成兩部分，一是探討金奈米粒子對毛細管電泳DNA分離的影響；二則以光合成法在蛋白質存在下製備奈米金球。利用聚環氧乙烯﹙poly(ethylene oxide)；PEO﹚以及金奈米粒子﹙gold nanoparticles；GNPs﹚在毛細管電泳系統中分離小片段DNA具有良好的再現性、高解析度以及快速分離之優點。本研究的第一部分進一步探討緩衝溶液之pH值、GNPs之濃度、染料分子與GNPs之間濃度的比例關係及鹽類的含量等因素對分離結果的影響。在pH 7.0-10.0範圍，以0.2% PEO﹙8M Da﹚及0.3X 56-nm GNPs﹙9.87 × 1012 particles/L﹚進行DNA markers V和VI混合物之電泳分離，發現GNPs在pH 9.0下對DNA的分離有較明顯的助益。固定pH 為9.0時，提高PEO與EtBr濃度則有助於小片段DNA的解析。雖然GNPs濃度增加時，會減少DNA與毛細管壁作用而使分離結果再現性佳，但是在固定PEO濃度與GNP/EtBr濃度比例之條件下，過多的GNPs存在反而使小於504 bp之DNA片段解析度變差。此外，研究中更進一步發現當在上述最佳條件中添加0.01 mM檸檬酸鹽﹙citrate﹚可使分離解析度增加及縮短分離時間。該條件並成母野峏顜硈t（7分鐘內）分離DNA Marker V（pBR322/ Hae III digest）、ψX 174 RF DNA-Hae III digest及lambda DNA Hind III digest之混合物（0.008-23.1 kbp）。第二部份則嘗試以光照法在蛋白質存在下合成GNPs。金奈米粒子的大小與反應速率受控於蛋白質與金離子的相對及絕對濃度，同時也受溶液pH值的影響。本研究中大小為7-12 nm的GNPs是在NaAuCl4及BSA的最終濃度為1 mM及10 μM時所得。依此比例，變換溶液pH值及環境溫度觀察奈米粒子變化情形，發現在pH 7.0條件下，GNPs的粒徑分佈較小且均勻。根據室溫下不照光時GNPs無法合成的結果，推論光為促使金離子還原的主要原因，而蛋白質則是防止GNPs聚集的保護劑。相較於傳統以檸檬酸鹽在加熱下還原金離子，此法可直接在PDMS上進行反應，且合成的GNPs以物理吸附方式吸附於PDMS表面，未來可應用於生物感測器的研究。

Subjects

金奈米粒子

毛細管電泳

DNA

capillary electrophoresis

gold nanoparticles

Type

thesis

File(s)

Name

ntu-93-R91223029-1.pdf

Size

23.31 KB

Format

Adobe PDF

Checksum

(MD5):f0bb94b455eb385fb1d55af1ce77c176