FMR1啟動子轉殖魚之研究

Abstract

X 染色體脆折症是引起遺傳性智能不足的 主要原因之一，在X 染色體脆折症患者， FMR1 基因內的CGG 重覆序列長度會增加， 並引起基因的甲基化。FMR1 基因的篩選雖 然解釋了X 染色體脆折症特殊的遺傳模 式，但是FMR1 的功能至今仍不清楚。 在我們過去的研究中，我們證實甲基 化是FMR1 基因表現抑制的直接原因

。我們進一步 分析FMR1 啟動子的構造，並發現FMR1 啟 動子中有一段序列(MSE)可以被cAMP 活化

。 然而過去我們想看細胞株內部FMR1表現變 化之努力卻不順利。最近有人報告FMR1 的 變化可能發生在極細微的構造中(如神經 之突觸)。因此FMR1 之變化必須直接在生 物體中研究，也就是利用轉殖動物。我們 要用的則是斑馬魚。我們將在斑馬魚魚卵 中注射由FMR1 啟動子驅動的LacZ 基因， 再用染色的方法，來判斷FMR1 啟動子表現 的位置。啟動子的不同片段經剪裁後接到 LacZ 基因的前方，再用來注射魚卵。 在研究的過程當中，我們發現所有 FMR1 啟動子片段所驅動的LacZ 基因，都不 會在魚卵中表現。在對照組實驗中，以CMV 啟動子片段所驅動的LacZ基因可以廣泛的 表現在魚的胚胎中，尤其是在york sac。 另外如果用GTP cyclohydrolase I 的啟動 子片段所驅動的LacZ 基因，則可以在腦部 看到表現。因此FMR1 啟動子無法以斑馬魚 魚卵注射來研究。