含豆科植物為基質之靈芝和巴西洋菇發酵液之保健食品研發─靈芝和巴西洋菇發酵液之肝臟保健功效評估及其作用機轉之探討(2/3)

Abstract

本計畫研究之目的乃在探討「靈芝-豆科」(GL)或「巴西洋菇-豆科」(AB)發酵產物之抑制肝癌活性與護 肝功能，並分析其所含三萜類(triterpenoids)活性成分與抑制肝癌活性之相關性，以及探討抑制肝癌之作用機 轉。計畫至目前為止，於「靈芝-豆科」發酵產物方面，以前一年度計畫所決定之最佳抑制肝癌活性之靈芝(菌 種皆為BCRC 36123)發酵條件，進行大量發酵(200 L 發酵槽)後所得之發酵產物與小量發酵(5 L 發酵槽)所得發 酵產物相較下，二者菌絲體乙醇萃取物中三萜類之HPLC 圖譜甚為相似，然而大量發酵產物之菌絲體乙醇萃 取率(9.9 g/100 g dry matter)較低，但Hep 3B 肝癌細胞經此大量發酵產物(100 μg/mL)處理後之生存率為 31.9±7.1% of control，所以其亦具有不錯的抑制肝癌活性。另外，以子計畫三於前一年度所決定之最佳抗氧化 肝癌活性之靈芝發酵條件，生產大量發酵產物(GL-93-12-21) (200 L 發酵槽)，與小量發酵產物(GL-92-10-22) (5 L 發酵槽)相較下，GL-93-12-21 菌絲體具有較低的乙醇萃取率(17.1 g/100 g dry matter)，但Hep 3B 肝癌細胞經 GL-93-12-21 菌絲體乙醇萃取物(100 μg/mL)處理後之生存率為24.5±0.6% of control，故其亦具有不錯的抑制肝 癌活性。於「巴西洋菇-豆科」發酵產物方面，分析最新生產的小量發酵產物，結果顯示AB-93-10-19 (菌種為 NCUC AB001)的菌絲體乙醇萃取率為16.4 g/100 g dry matter，較高於AB-93-12-4 與AB-94-2-1 (菌種皆為BCRC 36814)，但抑制肝癌細胞活性最佳者為AB-93-12-4 菌絲體乙醇萃取物(IC50 為13.5 μg/mL)，其發酵基質中含 20 g/L 黑豆和4 g/L 黃耆，發酵溫度為28℃，攪拌速率為250 rpm，通氣量為0.05 vvm，發酵天數為35 天。 再者，在「巴西洋菇-豆科」大量發酵產物方面，目前已有二批不同條件之樣品，經分析後結果顯示， AB-94-3-17-GF3 菌絲體具有較低的乙醇萃取率(17.1 g/100 g dry matter)，但卻有較佳的抑制肝癌細胞活性(IC50 為5.5 μg/mL)，其發酵條件與AB-94-3-10-GF 相較下，相異處在於此樣品之發酵條件為兩階段發酵模式。此外， 建立『具最佳抑制肝癌細胞活性之「靈芝-豆科」或「巴西洋菇-豆科」發酵產物對四氯化碳誘導大白鼠正常初 代肝細胞損傷之影響』之試驗模式，並分析日前具最佳抑制肝癌細胞活性之樣品(GL-92-10-3 與AB-93-3-17 菌絲體乙醇萃取物)，當二種樣品濃度分別為100 μg/mL 時，可有效減緩四氯化碳所誘導的大白鼠正常初代肝 細胞損傷。