沈立言臺灣大學：食品科技研究所林苡芬Lin, Yi-FenYi-FenLin2007-11-272018-06-292007-11-272018-06-292004http://ntur.lib.ntu.edu.tw//handle/246246/56264台灣罹患肝臟疾病的比率很高，而慢性肝臟疾病和肝硬化更是在十大死亡原因中位居第六名。此外，肝癌為十大癌症死亡原因之首。 因此，如何維持肝臟的健康在台灣是很重要之課題。而牛樟芝(Antrodia camphorata)是台灣傳統用來保護肝臟之中草藥。本研究的主要目的是欲尋求出能生產有效抑制肝癌之牛樟芝菌絲體發酵過濾液之發酵條件，並且探討不同碳源之牛樟芝菌絲體發酵過濾液對於人類肝癌細胞株Hep G2及Hep 3B細胞週期之影響。由實驗結果顯示，以lactose為發酵碳源之牛樟芝菌絲體發酵過濾液(filtrate of fermentation broth of Antrodia camphorata mycelia, FFBAM) 100-500 mg/ml與400-500 mg/ml分別處理Hep G2和Hep 3B，其細胞生存力均有顯著低於控制組(P<0.05)，而以glucose為發酵碳源之牛樟芝菌絲體發酵過濾液300-500 mg/ml處理Hep G2和Hep 3B，其細胞生存力亦有顯著之降低效果。另以glucose及lactose為發酵碳源之牛樟芝菌絲體發酵過濾液處理大鼠初代肝細胞，並不會對初代肝細胞生存力造成不良之影響，在以glucose及lactose為發酵碳源之牛樟芝菌絲體發酵過濾液200-300 mg/ml處理下，Hep G2細胞週期有被滯留在G2/M期。而在細胞週期調控蛋白之表現方面，以lactose為發酵碳源之牛樟芝菌絲體發酵過濾液處理Hep G2細胞發現，細胞中Cdc2及cyclin A的蛋白質表現量有隨處理樣品濃度之增加而有降低的現象，而對cyclin B1之蛋白質表現量則有隨處理樣品濃度之增加而有增加的現象。綜合上述結果可知，以lactose為發酵碳源之牛樟芝菌絲體發酵過濾液藉由影響Cdc2、cyclin B1及cyclin A等蛋白質表現而使得人類肝癌細胞株滯留於G2/M期。中文摘要 　　 1 英文摘要 　　 2 前言 　　 3 第一章 文獻回顧 　　 5 第一節 牛樟芝的簡介 5 第二節 肝癌的簡介 14 第三節 細胞週期及其調控 18 第二章 實驗動機與架構 21 第三章 材料與方法 25 第四章 結果 40 第一節 不同碳源牛樟芝發酵液對人類肝癌細胞株 生存力及形態之影響 　　　　 40 第二節 不同碳源牛樟芝發酵液對大鼠初代肝細胞 生存力之影響 　　　　 41 第三節 不同碳源牛樟芝發酵液三萜成分分析 　 41 第四節 不同碳源牛樟芝發酵液對人類肝癌細胞株 細胞週期之影響 　　　　 42 第五節 不同碳源牛樟芝發酵液對人類肝癌細胞株細胞週期之 週期素(cyclin)與週期素依賴性蛋白激酶(cyclin-dependent kinases, CDK)之影響 　　　　 42 第五章 討論 43 結論 46 參考文獻 671328453 bytesapplication/pdfen-US牛樟芝菌絲體發酵液人類肝癌細胞株human hepatoma cellsAntrodia camphoratathesishttp://ntur.lib.ntu.edu.tw/bitstream/246246/56264/1/ntu-93-R91641005-1.pdf