2006-11-012024-05-18https://scholars.lib.ntu.edu.tw/handle/123456789/701424摘要：評估基因改造食品的食用安全性對食品本身的安全性，以及對社會的風險溝通均非常重要。由於基因轉殖植物將外源基因導入植株中表現，形成新的RNA及蛋白質分子，可能導致新的成分產生，或是改變植物原有的成分組成，也可能影響其他基因的調控，或是產生非預期的效應。胡瓜嵌紋病毒(cucumber mosaic virus, CMV)是廣泛傳染於瓜類作物的常見病毒，往往造成植株矮化、葉片呈現班駁、暗淡綠色、葉片表面粗糙皮化，病徵嚴重時呈狹細絲狀、嵌紋、黃化、淡黃或壞死之輪點等現象，同時導致影響生長勢造成產量低落。過去數年亞蔬中心柳建安博士已成功建立轉殖抗胡瓜嵌紋病毒之基因轉殖番茄，經過人工授粉及兩子代的回交之後，發現轉殖基因及抗病毒性狀可遺傳至子代，同時並不會轉殖至其他近緣作物之中，因此適於推廣利用。本子計畫擬配合總計畫評估前述抗病毒基因改造番茄食用安全性的整體目標，製備番茄抗胡瓜嵌紋病毒之重組嵌蛋白(CMV coat protein)，同時製作此嵌蛋白的單株抗體，並開發建構此嵌蛋白之免疫分析平台，其中重組嵌蛋白可作為其他子計畫之試驗材料，而抗此嵌蛋白之單株抗體暨免疫分析平台亦可配合其他子計畫，分析不同生理時程番茄樣品之嵌蛋白含量。實驗上，將構築此嵌蛋白的表現載體，並分別於大腸桿菌表現重組之融合蛋白作為抗原，以及利用酵母菌大量生產重組之 CMV coat protein作為其他子計畫的試驗材料；另一方面，擬將重組嵌蛋白免疫小鼠，利用細胞融合技術建立融合瘤及單株抗體，並針對所得之融合瘤與單株抗體進行配對與最佳化，建構三明治模式之酵素連結免疫分析平台，未來可作為分析新鮮或是加工樣品中重組嵌蛋白含量之重要工具。<br> Abstract: not available基因改造番茄胡瓜嵌紋病毒生產重組蛋白單株抗體免疫分析