李源弘臺灣大學：材料科學與工程學研究所何宜珊2007-11-262018-06-282007-11-262018-06-282004http://ntur.lib.ntu.edu.tw//handle/246246/55311嚴重急性呼吸道症候群(Severe Acute Respiratory Syndrome, SARS)重創兩岸三地，且其高傳播力造成全球之恐慌，因憂心其捲土重來，而急欲尋求有效之控制方法。故本研究選擇與SARS病毒相似之豬生殖與呼吸綜合症(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome, PRRS)病毒進行實驗，其與SARS病毒歸於同目且均為具有封套之RNA病毒，因此具有相似之病毒特性。將病毒PRRS與蒙脫石作用後，使用高敏感度之反轉錄─聚合酶鏈鎖反應(Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction, RT-PCR)檢測法，結果發現蒙脫石具有吸附病毒之能力，其後利用MARC-145細胞與蒙脫石及竹醋作用後之PRRS病毒進行攻毒實驗，以間接螢光抗體(Indirect Fluorescent Antibody, IFA)染色法與穿透式電子顯微鏡(Transmission Electron Microscope, TEM)觀察細胞，證明經蒙脫石及竹醋處理後之PRRS病毒已失去感染能力。摘要 I 目錄 II 圖目錄 V 第一章 緒論 1 1-1 前言 1 1-2 研究目的 2 第二章 理論基礎與文獻回顧 3 2-1 蒙脫石 3 2-1-1 蒙脫石之晶體結構及物理化學性質 3 2-1-2 蒙脫石之分離純化 4 2-1-3 蒙脫石特性之應用 6 2-2竹醋 7 2-3豬生殖與呼吸綜合症病毒 10 2-3-1豬生殖與呼吸綜合症之歷史背景 10 2-3-2豬生殖與呼吸綜合症之臨床症狀及致病性 10 2-3-3豬生殖與呼吸綜合症病毒之特性 11 2-3-4豬生殖與呼吸綜合症病毒之基因特性及結構蛋白 12 2-3-5豬生殖與呼吸綜合症之診斷 13 2-4聚合酶鏈鎖反應 14 2-5 螢光抗體檢查法 17 2-5-1 螢光抗體之原理 17 2-5-2 螢光抗體法之特性 17 2-5-3 螢光抗體法之必要條件 18 2-5-4 螢光抗體法遭遇之困難 19 2-6 電子顯微鏡 21 2-6-1 光學的基本原理 21 2-6-2 電子顯微鏡的發展與種類 22 2-6-3 穿透式電子顯微鏡之構造 23 第三章 實驗方法 33 3-1 實驗材料 33 3-2 實驗儀器 35 3-3 實驗步驟 36 3-3-1 蒙脫石之純化 36 3-3-2 蒙脫石對病毒之吸附力研究 37 3-3-2-1蒙脫石與病毒反應 37 3-3-2-2 RNA病毒核酸之萃取 38 3-3-2-3反轉錄反應(Reverse transcription, RT) 38 3-3-2-4 聚合酶鏈鎖反應 (Polymerase chain reaction, PCR) 39 3-3-2-5 電泳分析 39 3-3-3 蒙脫石對病毒感染力之影響 40 3-3-3-1 細胞攻毒 40 3-3-3-2 螢光染色 40 3-3-3-3 穿透式電子顯微鏡(TEM)切片觀察 41 第四章 結果與討論 43 4-1 蒙脫石對病毒之吸附力研究 43 4-1-1 固定蒙脫石濃度 43 4-1-2 不同蒙脫石濃度 44 4-1-3 蒙脫石與不同濃度之竹醋溶液 44 4-2 蒙脫石對病毒感染力之影響 45 4-2-1 細胞攻毒 45 4-2-2 螢光染色 45 4-2-3 穿透式電子顯微鏡(TEM)分析 46 第五章 結論 62 參考文獻 643089938 bytesapplication/pdfen-US蒙脫石豬生殖與呼吸綜合症病毒竹醋間接螢光抗體染色法反轉錄─聚合酶鏈鎖反應穿透式電子顯微鏡Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction (RT-PCR)Bamboo VinegarPorcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus (PRRSV)Transmission Electron Microscope (TEM)MontmorilloniteIndirect Fluorescent Antibody (IFA) Stainsthesishttp://ntur.lib.ntu.edu.tw/bitstream/246246/55311/1/ntu-93-R89542016-1.pdf