黃世佑臺灣大學：化學工程學研究所廖珮妤Liao, Pei-YuPei-YuLiao2007-11-262018-06-282007-11-262018-06-282004http://ntur.lib.ntu.edu.tw//handle/246246/52137植物體胚發生(somatic embryogenesis)為利用植物細胞所具之全潛能性(totipotency)，以體細胞誘導不定胚之技術。體胚細胞培養技術可應用於植物育種(交雜育種、轉殖)以及開發人工種子。本研究以芹菜(Apium graveolens L.)葉為培植體, 利用SH培養基(含2,4-D 7.5Due to totipotency of plant cells, somatic cells of plants inherently tend to produce vegetative propagation through somatic embryogenesis. The investigation of somatic embryogenesis motivates an agricultural breeding and a large-scale artificial seed system. The celery (Apium graveolens L.) was used as a model system to investigate the induction and cultivation conditions of embryo cells. At first, leaves were used to induce the callus (SH basal medium, 2,4-D 7.5中文摘要 I Abstract II 目錄 III 圖目錄 VI 第一章 緒論 1 第二章 文獻回顧 3 2.1植物體胚發生及植株再生 3 2,2 影響體胚發生之因素 7 2.3 芹菜之組織培養及體胚誘導 13 2.3.1芹菜簡介 13 2.3.2芹菜組織培養 14 2.3.3芹菜的體胚誘導 15 2.4 密度梯度離心 16 第三章　材料與方法 18 3.1植物材料 18 3.1.1 無菌苗培養 18 3.1.2 癒合組織誘導與培養 18 3.1.3 懸浮培養系統之建立 18 3.2 藥品與儀器 19 3.2.1 實驗藥品 19 3.2.2 實驗儀器 19 3.3 實驗方法 20 3.3.1 生長曲線測定 20 3.3.2沉降細胞體積(SCV)、緊密堆疊細胞體積(Packed cell volume, PCV)之關係 20 3.3.3 懸浮細胞的粒徑分佈 21 3.3.4 不同粒徑大小的體胚發生率 21 3.3.5 不同基本鹽對體胚誘導的影響 21 3.3.6 體胚誘導隨時間之變化(time course) 22 3.3.7 不同培養基條件對體胚誘導的影響 22 3.3.8 不同前培養條件對體胚誘導的影響 25 3.3.9 以密度梯度離心分離誘導不同比重的細胞 27 3.3.10 石蠟切片 27 第四章 結果與討論 28 4.1 癒合組織培養 28 4.1.1 癒合組織培養生長曲線 28 4.2 芹菜懸浮細胞培養最適化 29 4.2.1懸浮培養細胞生長曲線 29 4.2.2 不同蔗糖濃度對芹菜懸浮細胞培養的影響 33 4.2.3 不同氨態氮與硝酸態氮比例對芹菜懸浮細胞培養的影響 34 4.2.4 不同總氮源濃度對芹菜懸浮細胞培養的影響 36 4.2.5 不同2,4-D濃度對芹菜懸浮細胞培養的影響 38 4.2.6 不同添加物對芹菜懸浮細胞培養的影響 39 4.2.7 不同鈣離子濃度對芹菜懸浮細胞培養的影響 41 4.3 芹菜體胚誘導與植株再生 43 4.3.1. 不同粒徑之絮聚體體胚發生率 43 4.3.2 不同基本鹽對體胚誘導的影響 46 4.3.3 芹菜體胚誘導隨時間變化(time course) 47 4.3.4 不同碳源對體胚誘導的影響 50 4.3.5 合併使用蔗糖及甘露糖醇的對體胚誘導的影響 52 4.3.6 不同濃度甘露糖醇對體胚誘導的影響 54 4.3.7 氨態氮與硝酸態氮比例對體胚誘導的影響 56 4.3.8 總無機氮源濃度對體胚誘導的影響 58 4.3.9 ABA(Abscisic acid)對體胚誘導的影響 60 4.3.10 初始pH對體胚發生的影響 62 4.3.11 添加物對體胚誘導的影響 63 4.3.12 肌醇對體胚誘導的影響 65 4.3.13 鈣離子對體胚誘導的影響 67 4.3.14 不同錐形瓶對體胚誘導的影響 69 4.3.15 不同封口鋁膜對體胚誘導的影響 71 4.3.16 前培養對體胚誘導的影響 73 4.3.17. 由癒合組織誘導芹菜體胚之形態觀察 92 第五章 結論 97 參考文獻 99 附錄 1071002681 bytesapplication/pdfen-US人工種子芹菜密度梯度離心體胚發生植株再生density gradient centrifugationceleryartificial seedsomatic embryogenesisplantlet regenerationthesishttp://ntur.lib.ntu.edu.tw/bitstream/246246/52137/1/ntu-93-R91524003-1.pdf