國立臺灣大學植物病理與微生物學系暨研究所林長平2006-07-262018-06-292006-07-262018-06-292004http://ntur.lib.ntu.edu.tw//handle/246246/17692本研究在進行花生簇葉病（Peanut witches’ broom, PNWB）病原菌質體 （phytoplasma）gyrB 基因選殖時，以Acholeplasma laidlawii及Mycoplasma spp. 等 細菌之gyrB 基因進行比對，根據其高保守性區域設計PCR 引子，再以花生簇葉 病病原菌質體DNA 為模板進行PCR 反應，獲得一1.4 kb 大小之PCR 產物，再 以此序列設計PCR 引子對以增幅出篩選用核酸探針，並藉以篩選花生簇葉病病 原菌質體之基因庫，遂獲得一選殖株重組質體pPGB 1-4 其DNA 嵌入片段包含 三個完整open reading frame（ORF）。而藉由pPGB 1-4 上已知序列及比對其他細 菌gyrA 基因核酸序列，設計PCR 引子對增幅出gyrA 篩選用探針，並成功的選 殖出另一重組質體pPGA 2-3，經核酸序列解序後與pPGB 1-4 序列共同進行核酸 序列分析，獲得另一完整的ORF 序列。其中ORF3 及ORF4 應分別為花生簇葉 病病原菌質體之gyrB 及gyrA 基因。由南方氏雜合反應的結果可發現在花生簇葉 病病原菌質體中應僅具有單一套（single copy number）之gyrB 基因及gyrA 基因。 而由RT-PCR 反應的結果可發現，在花生簇葉病病原菌質體中gyrB 及gyrA 基因 有可能是以gyrB-gyrA cotranscription 的方式進行轉錄。application/pdf349245 bytesapplication/pdfzh-TW國立臺灣大學植物病理與微生物學系暨研究所gyrB 基因gyrA 基因花生簇葉病otherhttp://ntur.lib.ntu.edu.tw/bitstream/246246/17692/1/922313B002059.pdf