郭生興臺灣大學:臨床牙醫學研究所周佳璇Chou, Chia-HsuanChia-HsuanChou2010-05-262018-07-092010-05-262018-07-092009U0001-1506200901193600http://ntur.lib.ntu.edu.tw//handle/246246/184172背景:血管內皮生長因子-A(Vascular endothelial growth factor-A，VEGF-A，簡稱VEGF)及胎盤生長因子(Placental growth factor，PLGF)都是屬於血管內皮生長因子家族(VEGF family)。VEGF 與VEGFR-2 結合可以引發腫瘤血管新生情形，在許多不同的人類癌症中，包括口腔癌，VEGF 有過度表現的情形。過度表現PLGF與病態的血管新生有關。迄今，PLGF在口腔癌中的表現還是未知；本研究以蛋白質層級觀察PLGF 在口腔癌及上皮變異的表現。料與方法:本研究利用免疫組織化學染色方法，探討VEGF和PLGF於100例口腔鱗狀細胞癌(OSCC)、66例口腔上皮變異(OED)及36例正常口腔黏膜(NOM)中的表現。利用 ANOVA、卡方檢定(Chi-square test)、Kaplan-Meier存活率方法及Cox proportional hazard regression model來分析VEGF及PLGF的表現與口腔鱗狀細胞癌患者臨床病理參數及存活率之相關性，並試圖尋找影響存活時間的獨立預後因子。果: VEGF在正常口腔黏膜的平均陽性標記指數為13% (最低)，口腔上皮變異組的平均陽性標記指數為22%(輕度上皮變異)、24%(中度上皮變異)、32%(重度上皮變異)，口腔癌組的平均陽性標記指數為 50% (最高)，可以看出從正常口腔黏膜、上皮變異至口腔癌，這個癌化的過程，VEGF 的表現增加的情形，且有達統計意義(P <0.001)；PLGF 平均陽性標記指數(LI)從正常黏膜組織(12%±4)、輕度上皮變異(20%±9)、中度上皮變異(26%±11)、重度上皮變異(30%±13)到口腔癌(51%±19)，有統計上顯著的增加(p<0.001)。在上皮變異中，隨著變異程度嚴重度，PLGF 表現也有顯著的增加(p<0.001)。VEGF 及PLGF 的表現和患者的性別、淋巴結轉移與否、癌症臨床分期有統計上相關。單變數分析當中，淋巴結轉移情形(N)、腫瘤分期(S)、VEGF 陽性標記指數(LI)、PLGF陽性標記指數(LI)、VEGF-PLGF 陽性標記指數(LI)都跟存活時間有關 ( p <0.05)；經過 Cox regression model 進行多變數分析以後, 僅有淋巴結轉移情形(N)、VEGF LI、PLGF LI、VEGF-PLGF LI 為影響存活時間的獨立因子 ( p <0.05 )。值得注意的是，當VEGF-PLGF同時表現多(> 40%)時，比起單獨VGEF 或PLGF 表現多時其影響存活率的危險率高達5.596 倍。論:在本研究中，VEGF及PLGF 在腫瘤中表現較高且具統計上意義；此外，VEGF及PLGF 的表現與口腔鱗狀細胞癌患者相關的臨床參數及存活率有相關。VEGF與PLGF 的協同作用可能可用來解釋較高hazard ratio 及較短存活時間。所以VEGF及PLGF 可以成為口腔癌預後的指標。Background:ascular endothelial growth factor-A (VEGF-A, abbrev. VEGF) and placenta growth factor (PLGF) belong to VEGF family. VEGF could induce tumor angiogenesis through binding to VEGFR-2, which was highly expressed in a variety of human cancers, including oral cancer. Over-expression of PLGF was known to be associated with pathological angiogenesis. The study examined PLGF expression at the protein level in oral cancer and oral epithelial dysplasia, in which no reports on the significance of PLGF expression is available to date.aterial and Method:n this study, we examined the expression of VEGF and PLGF in 100 specimens of oral squamous cell carcinoma (OSCC)、66 specimens of oral epithelial dysplasia (OED) and 36 specimens of normal oral mucosa (NOM) by immunohistochemistry. The correlation between the expression of VEGF and PLGF in OSCCs and clinicopathological parameters or survival of OSCC patients was analyzed by ANOVA, Chi-square and Kaplan-Meier survival analysis. Univariate and multivariate analyses (Cox proportional hazard regression model) were used to find the correlation between expression of VEGF and PLGF, clinicopathological parameters and survival, and try to seek independent predictors for survival time.esults:he labeling indices of VEGF from NOM (13%±6), mild dysplasia (22%±8), moderate dysplasia (24%±13), severe dysplasia (32%±14) to OSCC (50%±18: the most abundant) were noted (p<0.001). PLGF expression increased as samples ranged from NOM (12%±4), mild dysplasia (20%±9), moderate dysplasia (26%±11), severe dysplasia (30%±13) to OSCC (51%±19: the most abundant) was noted (p<0.001). The VEGF and PLGF expression correlated with gender, lymph node status and clinical stage (p<0.05).Multivariate analysis demonstrated that lymph node metastasis, VEGF LI>40%, PLGF LI>40% and VEGF-PLGF LI>40% were independent predictors for the survival time.It was noteworthy that when VEGF-PLGF was expression above 40% concomitantly, which raised the hazard ratio to 5.596.onclusion:n this study, PLGF and VEGF expression were significantly higher in OSCC than that in NOM and OED. In addition, VEGF and PLGF were correlated with some clinical parameters and survival. Synergism between VEGF and PLGF contributed to higher hazard ratio, and shorter survival time. VEGF and PLGF may be prognostic factors for OSCC patients.中文摘要 ------------------------------------7文摘要 ------------------------------------9一章 序論及文獻回顧------------------------11.1 口腔鱗狀細胞癌之概觀---------------------11.1.1 全球口腔癌之流行病學-------------------11.1.2 台灣口腔癌之流行病學 ------------------11.1.3 口腔癌相關之危險因子 ------------------12.1.4 癌前病變 ------------------------------13 .1.5 口腔鱗狀細胞癌臨床病理分期及治療預後 --13 .2 血管新生---------------------------------14.2.1 促進血管新生因子 ----------------------15.2.2 抑制血管新生因子-----------------------16.2.3 腫瘤血管新生 --------------------------16 .2.4 血管新生與腫瘤轉移---------------------17.3 VEGF 與癌症------------------------------18.3.1 血管內皮生長因子家族-------------------18 .3.1.1 VEGF-A ------------------------------18 .3.1.2 VEGF-B, PLGF ------------------------20.3.1.3 VEGF-C, VEGF-D-----------------------20.3.1.4 VEGF-E ------------------------------20.3.2 血管內皮生長因子接受器 ----------------21 .3.2.1 VEGFR-1------------------------------21.3.2.2 VEGFR-2------------------------------22.3.2.3 VEGFR-3, Neuropilin-1, Neuropilin-2 -23 .3.3 VEGF 的功能----------------------------24.3.3.1 血管通透性 --------------------------24.3.3.2 內皮細胞活化-------------------------24.3.3.3 內皮細胞存活 ------------------------24.3.3.4 內皮細胞增殖 ------------------------25.3.3.5 內皮細胞的侵犯和移動 ----------------25 .3.3.6 招募內皮先驅細胞 --------------------25.3.4 VEGF 與腫瘤關係 -----------------------26.3.5 VEGF 與口腔癌關係 ---------------------27.4 PLGF 與癌症 -----------------------------27.4.1 胎盤生長因子(Placental growth factor, PLGF)--27.4.2 PLGF 在組織裡的分布 -------------------------28.4.3 PLGF 的基因剔除(knock out)的影響 ------------28 .4.4 PLGF 擁有影響許多細胞的能力 -----------------29.4.5 PLGF 為促進血管新生因子 ---------------------29 .4.6 PLGF 在人類腫瘤中的表現 ---------------------30.4.7 PLGF 作為癌化及轉移化的正向調控者 -----------31.4.8 PLGF 作為癌化及轉移化的負向調控者 -----------31.4.9 PLGF 在其他疾病的表現 -----------------------32二章 材料與方法 ---------------------------------34.1 實驗樣本 --------------------------------------34.2 標本之固定與包埋 ------------------------------34.3 免疫組織化學染色(immunohistochemical stain)----34.4 免疫組織化學染色後之觀察與記錄 ----------------37三章 結果 ---------------------------------------39.1 VEGF 和PLGF 在正常口腔黏膜(NOM),口腔上皮變異(OED),口腔鱗狀細胞癌(OSCC)的表現 ----------------------39.2 免疫組織化學染色結果與患者各項臨床變數間及組織病理學數的關係 ----------------------------------------39.3 VEGF 與PLGF 表現與存活時間 --------------------41 四章 討論 ---------------------------------------43五章 結論 ---------------------------------------52六章 附表與附圖 ---------------------------------53考文獻 ------------------------------------------69目錄1 : VEGF 平均陽性標記指數在正常口腔黏膜、口腔上皮變異、口腔鱗狀細胞癌之表現情形 --------------------------------53 2 : PLGF 平均陽性標記指數在正常口腔黏膜、口腔上皮變異、口腔鱗狀細胞癌之表現情形 --------------------------------543 : VEGF的陽性標記指數與口腔鱗狀癌細胞病患臨床參數的關係---------------------------------------------------------554 : PLGF的陽性標記指數與口腔鱗狀癌細胞病患臨床參數的關係---------------------------------------------------------565 : VEGF的陽性標記指數與口腔癌病患吸菸、喝酒、咀嚼檳榔習慣的關係-------------------------------------------------576 : PLGF 的陽性標記指數與口腔癌病患吸菸、喝酒、咀嚼檳榔習慣的關係-----------------------------------------------587 : 以Cox proportional hazard regression model 進行單變數分析及多變數分析VEGF LI、PLGF LI 及、臨床參數與存活時間的關係-----------------------------------------------------59目錄1: VEGF 於正常口腔黏膜、上皮變異及腫瘤細胞之表現------602: PLGF 於正常口腔黏膜、上皮變異及腫瘤細胞之表現------623: Kaplan-Meier 存活率分析圖--- N(淋巴結轉移)與累積存活率的關係--------------------------------------------------644: Kaplan-Meier 存活率分析圖---S(腫瘤分期)與累積存活率的關係----------------------------------------------------655: Kaplan-Meier 存活率分析圖---VEGF 與累積存活率的關係-666: Kaplan-Meier 存活率分析圖---PLGF 與累積存活率的關係-677: Kaplan-Meier 存活率分析圖---VEGF-PLGF LI 與累積存活率的關係---------------------------------------------------68application/pdf4072927 bytesapplication/pdfen-US血管內皮生長因子胎盤生長因子口腔鱗狀細胞癌口腔上皮變異vascular endothelial growth factorplacenta growth factororal squamous cell carcinomaoral epithelial dysplasia[SDGs]SDG3http://ntur.lib.ntu.edu.tw/bitstream/246246/184172/1/ntu-98-R96422010-1.pdf