Project title
以競爭式核酸聚合脢鏈反應法定量黏液素基因以輔助診斷癌性胸水
Internal ID
NSC86-2314-B002-067
Principal Investigator
Start Date
August 1, 1996
End Date
July 31, 1997
Organizations
Partner Organizations
Application of Quantitative Competitive PCR in Assissting the Diagnosis of Malignant Pleural Effusion = 以競爭式核酸聚合脢鏈反應法定量黏液素基因以輔助診斷癌性胸水
Keywords
Malignant pleural effusion
Mucin
Mucin gene
Polymerase chain reaction (PCR)
Adenocarcinoma
Glycoprotein
Description
胸水為癌症常見的併發症。癌性胸水的來源以肺炎及乳癌為主 (約佔50%-70%)，且多半為腺癌。癌性胸水的診斷有賴於肋膜積液細胞學檢查發現癌細胞的存在。但是仍然有30-50%之之胸水有診斷上的困難，可能因為取樣不足、癌細胞太少或是細胞檢驗人員缺乏經驗。為了彌補細胞學檢驗之缺點，研究人員嘗試過許多輔助診斷方式。但是，仍有20%病患無法由胸水檢驗獲得確定診斷。黏液素為高醣化、高分子量之醣蛋白家族，覆蓋於許多上皮細胞之表面。目前，以找到八種黏液素基因 (MUC1-MUC7)。癌細胞常見有黏液素蛋白過度分泌、醣化異常等黏液素異常表現之情形。由許多研究癌細胞之黏液素蛋白及黏液素基因表現之報告中，我門可歸納出兩個重要現象：(1) 黏液素蛋白及醣化異常現象語言細胞侵犯有正相關；(2) 愈後期的腫瘤，愈有多種黏液素基因異常表現。在先前的研究中，我們使用北方墨點雜交法，點狀墨點雜交法，反轉錄核酸聚合脢鏈反應法 (RT-PCR)，及免疫組織化學染色法分析肺癌之黏液素蛋白及基因表現亦獲致相近的看法。本研究計畫之共同主持人也證實在在癌性胸水中可測得黏液素蛋白。本研究計畫之構想乃源自先前敘述之觀察—黏液素基因之過度異常表現見於後期癌 (advanced cancer)，我們向以競爭式核酸聚合脢鏈反應法分析胸水中之黏液素基因表現。藉由核酸聚合脢鏈反應法之高敏感性以偵測胸水中癌細胞之黏液素基因核醣核酸 (RNA)。又因為淋巴球具有微量之黏液素基因表現，以QC-PCR定量黏液素基因之RNA可以設定一臨界值以獲取診斷癌性胸水之高敏感性與特異性。我們希望以兩年期間蒐集一百二十例胸水 (六十例癌性胸水，六十例非癌性)，並測試此一方法之可行性。在第一年計畫執行五個月後，以收集到23例癌性胸水，30例非癌性胸水，並建立好MUC1，MUC2，MUC5AC 及 G(-like(a housekeeping gene) 之QC-PCR必需之internal standard；目前已積極進行RNA抽取及QC-PCR中。